تهیه سازه اختصاصی بذر حاوی قطعات omega و sar به منظور افزایش بیان ژن در بذر گیاه

Authors

مهسا مکانیک

خدیجه باقری

بهرام ملکی زنجانی

مسعود توحیدفر

abstract

پایین­بودن سطح بیان ژن­ها، از مهم­ترین فاکتورهای محدودکننده تولید پروتئین­های نوترکیب در گیاهان می­باشد. انتخاب بافت مناسب گیاه جهت بیان و نیز بهبود تظاهر قطعه ژنی از جمله راه­های افزایش بیان ژن در گیاه می­باشند. در این پژوهش با طراحی و تهیه سازه اختصاصــــی بذر به­هــــمراه قطعـــات افزایـــنده بیــان ژن؛ omega(tobacco mosaic virus 5' –leader) و sar (scaffold attachment region) سعی شده است تا ضمن بیان اختصاصی ژن موردنظر در بذر گیاه، بیان آن نیز افزایش یابد. توالی omega مورد استفاده، به­عنوان یک تنظیم­کننده ترجمه عمل می­کند و کارآیی ترجمه را بالا می­برد و توالی sar با مکانیزم­های مختلف می­تواند از خاموشی ژن منتقل­شده جلوگیری کند. در ابتدا با طراحی آغازگرهای اختصاصی و انجام واکنش pcr قطعه omega به ابتدای ژن gus متصل شد. قطعه­ی sar (ps206-1)  نیز از ژنوم گیاه توتون جداسازی گردید. سپس دو قطعه با استفاده از روش soeingpcr به هم متصل شدند به­نحوی­که توالی omega در بالادست ژن gus و توالی sar در پایین­دست آن قرار گرفت. صحت قطعه حاصله (ω-gus-ps206-1) با استفاده از هضم آنزیمی و توالی­یابی مورد تأیید قرار گرفت. سپس ساب­کلونینگ در ناقل گیاهی pbi121 حاوی پیش­برنده اختصاصی بذر انجام شد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

تهیه سازه حاوی توالیهای omega و sar جهت افزایش بیان ژن گزارشگر gus در بذر

از مهمترین فاکتورهای محدود کننده تولید پروتئنیهای نوترکیب در گیاهان، پائین بودن سطح بیان ژنهای وارد شده است. انتخاب بافت مناسب گیاه جهت بیان و نیز بهبود تظاهر قطعه ژنی از جمله راههای افزایش بیان ژن منتقل شده به گیاه می باشد. در این پژوهش با طراحی و تهیه سازه اختصاصی بذر به همراه قطعات افزاینده بیان ژن (omeg و sar) سعی شده است تا ضمن بیان اختصاصی ژن مدنظر در بذر گیاه، افزایش بیان قطعه ژنی را نیز...

بیان آنزیم فعال بتا-گلوکورونیداز در بذر گیاه توتون

هدف: طراحی و تهیه سازه ژنی مناسب و انتقال آن به گیاه توتون و بررسی گیاهان تراریخت حاصله بوده است.مواد و روش‌ها: سازه اختصاصی بذر حاوی پیشبرنده Napin، توالی Ω ، ژن GUS و توالی SAR در پلاسمید pBI121 طراحی و تهیه و در باکتری E. coli تکثیر شد. ریزنمونه‌های برگی توتون با آگروباکتریوم سویه LBA4404 به‫روش استاندارد تلقیح شدند. گزینش جوانه‌های باززایی شده در محیط...

full text

تهیه سازه rnai اختصاصی بذر برای ژن های رمزگردان آلفا زئین 19-kda ذرت

وجود سازه اختصاصی بذر برای تغییر ژنتیکی پروفایل پروتئین های ذخیره ای دانه ذرت از مهمترین نیازهاست که در این تحقیق هدف گیری شده است. پروتئین های ذخیره ای غالب دانه ذرت، یعنی زئین ها که60% پروتئین های ذخیره ای دانه ذرت را تشکیل می دهند ، از نظر محتوای اسیدآمینه های ضروری مانند لیزین و تریپتوفان دارای کمبود هستند که این امر منجر به کیفیت غذائی پائین دانه ذرت می شود. از طریق شناسایی موتانت ها یا دس...

15 صفحه اول

تهیه سازه های مناسب به منظور بیان ژن اینترفرون گامای انسانی در leishmania tarentolae

مقدمه و هدف: افزایش کاربردهای درمانی برای اینترفرون گامای انسانی نوترکیب (hrifng) که یک سایتوکین پیش­التهابی ضدویروسی است، موجب گسترش روش­های بهینه­سازی تولید آن شده­است؛ در این مطالعه، تولید این گلیکوپروتئین در سیستم یوکاریوتی تک­سلولی leishmania tarentolae که از مارمولک tarentolae annularis به­دست­می­آید، برای بیان ژن هترولوگ مورد بررسی قرارگرفته­است.    مواد و روش­ها: به­منظور تکثیر cdna ژن ...

full text

غنی سازی آرد گندم با نسبتهای مختلف پودر بذر گیاه دارویی رازیانه به منظور افزایش ارزش تغذیه ای نان

اکثر نان‌های تولیدی کشور از کیفیت پایین تغذیه‌ای برخوردارند. غنی سازی نان با گیاهان دارویی یک روش جدید به منظور بهبود ارزش تغذیه‌ای آن است. هدف از این تحقیق دستیابی به ترکیب مناسبی از مخلوط پودر دانه رازیانه به منظور غنی‌سازی آرد گندم از نظر مواد معدنی و آنتی‌اکسیدان‌ها بود. برای این منظور، 100 گرم آرد سفید با نسبت‌های مختلفی از پودر رازیانه شامل 3، 5، 7، 10، و 15 گرم مخلوط گردید. خواص فیزیکی (...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
دوفصلنامه فن آوری زیستی در کشاورزی(علمی-پژوهشی)

Publisher: دانشگاه بوعلی سینا

ISSN 1735-7446

volume 4

issue 2 2014

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023